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FAIMS Pro全新升级---FAIMS Pro Duo

FAIMS Pro 相信很多老师对于赛默飞的FAIMS Pro(High-field asymmetric waveform ion mobility spectrometry,高场非对称波形离子迁移谱)接口已经非常熟悉和了解了。FAIMS Pro(图一)是一种在大气压条件下分离离子的技术,安装在大气压离子源与MS真空腔的入口之间,通过电极上的补偿电压除去蛋白质组学样品中一价离子对检测带来的干扰,降低背景噪音,从而扩大蛋白鉴定的深度。 图1 Exploris 480 质谱仪 配置FAIMS Pr...

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满足合规需求的分子量质量控制策略

背景引入 近年来,分析技术的不断发展进步,特别是高分辨质谱仪和半自动软件平台的创新,为制药企业及CRO、CMO公司提供了更加可靠、高效的工具。比如,使用质谱技术能够区分密切相关的组分并对这些组分进行定量测量。[1]这其中,发展最为迅速的就是获得大家广泛关注的MAM策略。2019年,FDA对MAM应用于QC提出了指导性的建议,即需要解决四部分问题,包括风险评估、方法验证、未知物质谱检测(New peak detection,NPD)功能的能力和特异性考察、以及与传统方法的比较。这也使得MAM的定义...

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文献综述:浅谈蛋白样品中二硫键的ETD质谱碎裂机理

二硫键是在细胞内蛋白质生物合成过程中,在两个半胱氨酸(Cys)的硫原子之间形成的蛋白质的翻译后修饰。二硫键在蛋白质折叠过程中起着重要的作用,稳定蛋白质的天然高阶构象,这些构象是执行其生物功能所必需的。蛋白质中二硫键连接模式的定位为蛋白质稳定性、结构-功能关系以及二硫键介导的蛋白质亚型的研究提供了重要信息。此外,二硫键的表征在生物制药的开发过程中具有重要的意义,以确保生物制剂的安全性和有效性。然而由于生物分子的复杂性,对蛋白质中二硫键的精确表征分析仍具有一定的挑战性。 随着质谱技术的出现,液相色谱...

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Orbitrap高分辨质谱技术用于重组腺相关病毒 (AAV)衣壳蛋白表征分析

由于高效转导和安全性,重组腺相关病毒 (rAAV) 载体已成为基因治疗的主要基因传递载体。野生型 AAV 颗粒包含单链 DNA 基因组和由三种结构病毒蛋白(VP1、VP2和VP3)组成的衣壳,它们以大约 1:1:10 的比例组装病毒颗粒。每个VP在C端有一个重叠序列,仅在其N端区域不同。AAV衣壳的表面成分是参与细胞结合、内化和在靶细胞内运输的重要成分。需要对病毒蛋白进行完整表征,以确保AAV产品的安全性、质量和功效。 高效液相色谱质谱 (UHPLC-MS) 技术为衣壳蛋白表征提供了更快、更灵敏...

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文献分享:蛋白质组学来助力-发现SHP2-DOK1-尿苷轴预防与治疗骨关节炎的新途径

热点 第十一届中国蛋白质组学大会于10月15日在英雄的武汉顺利落幕,期间国内外蛋白质组学领域内的专家大咖们为与会者带来了一场学术的盛宴。本届蛋白质组学大会以“蛋白质组学驱动的精准医学”为主题,蛋白质组学在精准医学领域中的应用中,除了鸿篇巨制式的大临床样本量的蛋白质组学研究外,烹小鲜式的使用蛋白质组学的技术在疾病靶点、机制的发现中的应用同样精彩。 我们在这里分享一篇基于蛋白质组学技术进行骨关节炎疾病的分子机制研究的文章,本文由南京大学生命科学学院与中科院上海药物所合作,于2021年9月27日发表于...

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疫情后时代,疫苗新时代,疫苗评价利器之Orbitrap

疫苗是人类抵御疾病的重要武器,是成本最低、效果最好的疾病防御手段。从天花到鼠疫,从乙肝到新冠,疫苗帮助人们减少了一个又一个强传染性和高致病率疾病的发生。新型疾病的出现,呼吁新型疫苗的研发。新型疫苗的出现,提高了公众抵御疾病的能力。从疫苗研发到使用,需要经历选种、发酵/合成/转录、收获、纯化和成品等环节。 每个环节都离不开质量评价。疫苗的质量评价主要分生物评价和理化评价两种。生物评价长期以来作为疫苗主要评价方法,用于疫苗活性和毒性检测。但生物评价通常操作繁琐、耗时较长且需要大量动物。理化技术具有通...

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超高分辨质谱用于新冠疫苗质量评价

今日看点 在之前的文章中我们系统介绍了以Orbitrap为代表的质谱技术在疫苗研发和质量评价中的应用。本文我们将详细介绍Orbitrap如何助力新冠疫苗质量评价。 到目前为止,我国共五条主要新冠疫苗路线:灭活病毒新冠疫苗(中国生物、科兴中维等)、腺病毒载体新冠疫苗(康希诺等)、核酸类新冠疫苗(复兴医药、苏州艾博等)、亚单位新冠疫苗(智飞生物等)和减毒活疫苗,结构示意图如图1所示。 图1 五种新冠疫苗结构示意图(点击查看大图) 其中,灭活病毒新冠疫苗组成最为复杂(图2),不仅包括主要抗原S蛋白,还...

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